| 关键词 脂肪酸甲酯，快速，分离度
摘要本文通过赛默飞Trace 1300系列气相色谱仪器，在国标GB/T5009.168-2016《食品中脂肪酸的测定》的基础上建立了快速检测方法。使37种脂肪酸甲酯的分离在40min内完成，且37种化合物的分离度均大于1.25，满足国标需求。运用本方法对食品中脂肪酸甲酯的分析，有效提高了分析速度。终确认了50M的TG-FAME色谱柱满足实验需求。并在MS上对各组分进行了初步定性。
1．引言
脂肪作为人体的三大供能营养素，对人体有许多重要的生理作用。 油脂中 90% 以上是脂肪酸，而脂肪酸又分为饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸。多不饱和脂肪酸中含有的n-6和n-3脂肪酸属必需脂肪酸，是人体无法合成而必须从食物中获取的。2016年发布国标GB/T 5009.168-2016《食品中脂肪酸的测定》，规定了脂肪酸的检测方法，本方法依据并改进了该标准方法对食品中的脂肪酸进行了测定。
2. 实验部分 2.1.1 Thermo Fisher Trace1300气相色谱仪 2.1.2 Thermo Fisher ISQ质谱仪 2.1.3 二氯甲烷（色谱纯，美国Thermo Fisher公司）； 2.1.4 37种脂肪酸甲酯混合标准品购自SIGM-ALDRICH公司
2.2 化合物信息及溶液配制
表一37种脂肪酸甲酯信息：
 注：上表来源于Sigma-Aldrich公司标准品附带的COA报告。
2.2.2 储备液：称取37种脂肪酸甲酯混合标准品适量（总浓度10000ppm），二氯甲烷溶解，配制储备液总浓度为 1000 μg/mL，具体单个组分浓度详见上表。
2.2.3 样品溶液：取食用油样品适量，移入到250mL平底烧瓶中,加入约100 mg 焦性没食子酸, 加入几粒沸石, 再加入2mL95%乙醇和4mL水, 混匀。加入2%氢氧化钠甲醇溶液8mL, 连接回流 冷凝器,80℃水浴上回流,直至油滴消失。从回流冷凝器上端加入7mL15%BF3甲醇溶液, 在 80℃水浴中继续回流2min。用少量水冲洗回流冷凝器。 停止加热, 从水浴上取下烧瓶, 迅速冷却至室温。准确加入15 mL 二氯甲烷, 振摇2 min,再加入饱和氯化钠水溶液, 静置分层。吸取上层二氯甲烷提取溶液大约5mL, 至25mL试管中, 加入大约5g无水硫酸钠,振摇1min, 静置5min, 吸取上层溶液到进样瓶。
2.3色谱条件
2.3.1 50M色谱柱条件 色谱柱：TG-FAME（50m×0.25mm，0.25m）（P/N:26054-5920）
3. 实验结果与讨论
3.1 实验结果 3.1.1 标准品检测结果 采用上述仪器分析方法，使用TG-FAME 50m色谱柱分析37种脂肪酸甲酯，在39.5分钟内均可获得良好的色谱峰，且分离度大于国标要求的1.25。图1为混标测试图谱。 
3.1.2样品检测结果 在相同仪器分析条件下，甲酯化后的食用油样品中脂肪酸甲酯与基质分离效果良好，峰形尖锐对称，且分离度大于国标要求的1.25。 3.1.3MS定性分析： 重复上面方法条件，载气为He气，扫描范围50-350，传输线260℃，离子源280℃。从全扫图上看，总浓度为1000ppm的标准品，仅分析出36个峰，重复试验，均为36个峰。如图3所示： 对比氮气的分析图，发现34号峰后面的位置峰丢失（图3红圈内位置）。由于脂肪酸甲酯提取离子比较相似，无法直接提取出丢失的目标物。调整方法为恒压模式，柱头压为100kPa，其他条件不变，在推测的丢失位置出现目标峰，如图4所示：
对37种物质进行NIST谱库对比，对应处相应化合物，出峰顺序如下：
3.2讨论 在国标中，100m色谱柱对化合物的分离效果良好，但分析时间较长，通常在60-80min之间，选择50m的TG-FAME色谱柱，在分离的同时，缩短分析时间在39.5min以内，实现了分析速度的提升。TG-FAME为脂肪酸甲酯分析用柱，可以有效提高分析速度的同时分离效果，是快速分析37种脂肪酸甲酯的优良选择。 参考文献：Separation of 37 Fatty Acid Methyl Esters Utilizing aHigh-Efciency 10m Capillary GC Column with Optimization in Three Carrier Gases
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