| 摘要 本文尝试采用比ELSD灵敏度更高的电雾式检测器（以下简称CAD），以及柱性能更好的AccucoreTM核壳型色谱柱对蒸馏型白酒中三氯蔗糖进行检测，取得了较为 理想的效果：方法定量限可达0.04mg/kg，满足GB22255-2014定量限7.5mg/kg的基本要求。
关键词
液相色谱，三氯蔗糖，蒸馏白酒，电雾式检测器
1．引言
白酒是我国传统的蒸馏酒类型，历史久远，芳香浓郁，近年来随着市场竞争的日益激烈，个别企业为了迎合销售者不断提升的产品需求，尝试添加甜味剂来改变白酒风味，增加回甜感；然而，我国强制性国家标准GB2760-2014《食品添加剂使用标准》明确规定，蒸馏 酒中禁止加入各类甜味剂。因此，如何快速准确的对白酒中可能添加的甜味剂进行检测成为白酒监管部门的一大挑战。 三氯蔗糖是一种以蔗糖为原料生产的功能性甜味剂， 其甜度是蔗糖的600倍，由于安全性相对较高，近年来在食品和保健品中的应用日益广泛。与其它常见的甜味剂（如安赛蜜、糖精钠等）不同，三氯蔗糖不含生色基团，没有明显的紫外吸收，因此国家标准GB22255 -2014《食品中三氯蔗糖的测定》规定采用RI或ELSD对三氯蔗糖进行测定，但由于RI和ELSD的仪器灵敏度较低，方法检测限仅为2.5ppm，对于规定不得检出三氯蔗糖的白酒样品，可能产生假阴性结果。 本文尝试采用比ELSD灵敏度更高的CAD检测器，及柱性能更好的核壳型色谱柱对白酒中三氯蔗糖进行检测，取得了较为理想的效果：方法定量限可达0.04 mg/kg，满足GB22255-2014定量限7.5mg/kg的基本要求。
2. 实验部分
2.1 仪器与试剂
2.1.1 液相色谱仪（Thermo Scientific UltimateLPG 3400系列，包括带在线脱气单元的低压四元梯度泵，自动进样器，柱温箱，电雾式检测器）
2.1.2 超纯水机（Thermo Scientific GenPure ProUV-TOC，P/N：50131948）
2.1.3 乙腈（色谱纯，Fisher Chemical，P/N:A998-4）
2.1.4 三氯蔗糖标准品（Dr. Ehrenstorfer GmBH）
2.2 化合物信息及溶液配制
2.2.1 三氯蔗糖信息息（表 1）
2.2.2 标准品溶液：精密称取三氯蔗糖对照品适量，加水溶解定容为 1.0 mg/mL 的混合溶液，作为1000 ppm 的标准贮备液。精密量取标准贮备溶液适量，以水稀释制成浓度为10、5、2、1、0.5、0.2ppm的系列混合标准溶液。
2.2.3 样品溶液：精密称取样品5.0 g，置于50 mL蒸发皿中，于沸水浴上蒸干，残渣用1.00 mL 流动相溶解，溶液过0.45 μm滤膜，取续滤液作为供试品溶液。
2.3 色谱条件
色谱柱：Accucore C18（4.6×150mm，2.6 μm）（P/N：17126-154630） 柱 温 ：35 ℃； 进样量：20 μL； 流动相：乙腈:水（10:90） 流 速：1.0ml/min 检测器：CAD Veo RS，雾化温度50℃，Filter：5.0
3 实验结果与讨论
3.1 色谱柱选择
尝试采用常规C18色谱柱结合ELSD对样品进行分析，不但分析时间长，且基质干扰严重，个别样品经质谱二次确认发现为假阳性，后改为柱效更高的Accucore C18色谱柱，结果发现可有效排除基质干扰（图1中三氯蔗糖色谱峰与附近杂质峰在普通C18色谱柱上重叠）。 3.2 CAD 检测器雾化温度优化 对于挥发性较弱的化合物，可通过提高CAD检测器雾化管温度有效降低流动相本底干扰，从而提高信噪比和方法灵敏 度。经对比发现，CAD对三氯蔗糖检测灵敏度明显高于ELSD，当进一步提高CAD雾化温度后（由35℃提高至 50℃），在相同进样量下，三氯蔗糖信噪比可进一步提高5倍以上，故确定本方法的雾化温度为50℃。（对于Veo检测 器而言， 50℃为雾化温度上限值。）
 3.3 方法的重现性取浓度为1 ppm标准溶液，连续进样5次，保留时间和峰面积的RSD分别为0.07%和1.13%，说明本方法精密度良好。 3.4 方法的线性、检出限 取不同浓度三氯蔗糖对照品溶液分别进样 20 μL，以三氯蔗糖的浓度 x 与峰面积 y 直接进行线性回归。结果表明： 在0.2 ~ 10.0 μg/mL 浓度范围，呈现出良好的线性关系，线性方程及曲线见表 3 及图 4。
取浓度为 0.2 μg/mL 和 0.1 μg/mL 标准溶液，分别进样 20 μL，测得信噪比约为 10 和 3，故本品的仪器定量限为 0.2μg/mL，检测限 0.1 μg/mL（图 5）；按照处理方法进行折算，方法定量限可达 0.04 μg/mL，方法检测限可达0.02 μg/mL。
 3.5 实际样品的分析 按上述方法分别测定 3 种白酒样品，结果见表 4。
3.6 方法的加标回收率
取样品#102 做加标回收率考察，结果见表 5。 4 实验结论 本实验采用AccucoreTM柱，结合电雾式检测器建立了白酒中三氯蔗糖的灵敏快速测定方法。与ELSD方法比较，不但灵敏度更高，而且CAD检测器在中低浓度范围响应基本接近线性，选择合适的浓度范围后可直接进行线性拟合，结果统计比ELSD的“双对数拟合”更加方便。 根据方法学考察结果显示，各项数据优于现有的国家标准方法，可作为白酒中三氯蔗糖检测的方法参考。 5 参考文献 [1] GB2760-2014《食品添加剂使用标准》 [2] GB22255-2014《食品中三氯蔗糖的测定》 原创作者：赛默飞世尔科技（中国）有限公司 |
