摘要 本文基于赛默飞Ultimate 3000液相色谱平台针对血液 样本中维生素A、E建立了快速检测方法。维生素A、E 在其适宜的浓度范围内线性关系良好(VA:0.06-3.6 ug/mL,相关系数>0.9994;VE:0.6-36 ug/mL,相关系 数>0.9997),三次连续进样峰面积重现性RSD0.56%满 足规定的检测要求,运用本方法对血液样本中维生素A、 E检测具有指导意义。 人体能以较低限度但足够的量储存维生素 A,直到患某 种疾病或其他情况, 如怀孕(由于身体需要量增加)。 血清维生素 A低于 0.2ug/mL 表示不足,低于 0.1ug/mL 表示缺乏,膳食中维生素 A 或胡萝卜素不足,或由于吸收不良都可能引起缺乏,临床表现主要是眼和皮肤; 血清维生素 A 含量增高可引起急性、慢性及致畸毒性。 维生素 E 也叫生育酚,人血清中维生素 E 的正常值在11.6~46.4umol\L,缺乏易导致流产、不孕不育。过量则导致血栓性静脉炎、肺栓塞、下肢水肿、免疫力下降等问题。 维生素 A、E 的检测在临床上具有重要意义。该方案针对的医院科室:儿保科、妇产科、消化内科、皮肤科、眼科、内分泌科。 2. 实验部分
2.1.1 Thermo Fisher Ultimate 3000 DGLC双三元液相色谱仪,泵:DPG-3600SD Pump,自动进样器:WPS-3000SL ,柱温箱:TCC-3000SD,检测器:FLD-3400RS,色谱软件:变色龙Chromeleon 7.2 2.1.2 试剂、标品(色谱纯,具体流动相详情请咨询赛默飞液相 应用工程师) 2.2 化合物信息及溶液配制 2.2.1 系列标准曲线:配制VA系列标准溶液 0.06 ug/mL –3.6 ug/mL。配制VE系列标准溶液0.6 ug/mL – 36 ug/mL。 2.2.2 配制VA内标溶液7.5 ug/mL,VE内标溶液7.5mg/mL 2.3色谱条件 色谱柱:Thermo Accucore aQ (50×3.0mm) 柱温:35 ℃ ; 进样量:5 μL; 波长:荧光检测器波长设置见表3 流动相:详情请咨询赛默飞液相应用工程师,梯度洗脱程序(表1) 3. 实验结果与讨论
3.1 重现性测试 采用上述仪器分析方法,维生素 A、E 及其内标在 3.9分钟内均可获得良好的色谱峰,图 1 为三针连续进样叠图其中维生素 A、E的测试结果见表 2。
3.2 线性范围测试 采用上述仪器分析方法,对维生素 A、E 进行线性范围测试,线性相关系数 r2 均大于 0.999,线性关系良好。维生素 A、E 线性叠图见图 2,线性范围、线性相关系数等结果见表 4,线性方程图见图 3。
原创作者:赛默飞世尔科技(中国)有限公司 |